澳门新蒲京娱乐游戏噬菌蛭弧菌微死物死态造剂正在虾蟹养殖上的利用

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1、微生态制剂的分类方法较多

中国水产门户网报道由于我国虾蟹养殖用药品生产和使用极不规范,养殖者盲目使用抗菌药物和消毒剂,造成虾蟹产品药物残留严重超标,使得我国虾蟹产品出口在国际市场屡屡受挫折。因此,要彻底解决抗生素及其他化学药物残留对人体的危害,拓展虾蟹产品在国际市场上的出口规模,我国水生动物养殖用药品的生产和使用一是必须规范,二是要寻求抗生素及其他化学药物的替代品,力求实施无公害养殖。目前困扰我国虾蟹养殖业的主要病害有病毒性、细菌性和寄生虫三大疾病。其中细菌性疾病的发病率占80%以上。当前虾蟹细菌病的流行仍是限制虾蟹的主要因素。如虾蟹烂眼病、红腿病、白黑斑病、黑鳃病、烂鳃病、褐斑病(甲壳溃疡病、黑斑病)等疾病的病原均为细菌。在这些病原性细菌中主要有嗜水气单胞菌、苏伯利气单胞菌、非霍乱弧菌、鲁氏耶尔森氏菌、点状产气单胞菌。其中嗜水气单胞菌和弧菌是主流菌群。近年来,我国虾蟹养殖规模逐步扩大,放养密度愈来愈大,加上养殖池塘老化和水域日益污染的影响,致使虾蟹细菌性疾病经常暴发和流行,流行区域不断蔓延扩大,给养殖业造成了极大的经济损失。因此,做好虾蟹细菌病的有效防治,提高水产品养殖的经济效益和社会效益,是目前虾蟹养殖的重要任务。在虾蟹养殖过程中,对于细菌病的防治,应实施预防为主,防重于治的虾蟹健康养殖模式。在养殖措施上,选择健康的种苗,优化养殖环境和辅助药物防治措施等。在选择药物时,要坚持选用安全、高效、低毒的药物。微生物生态制剂近年来在虾蟹养殖用药品中异军突起,因此微生物生态制剂在虾蟹养殖用药品中是首选药物之一。微生物生态制剂它可以有效地调节水体pH值,降解亚硝酸盐,维持生态平衡,改善养殖水体。调整虾蟹肠道内菌群的微生态平衡,促进新陈代谢,刺激水生物细胞免疫系统,有效地提高虾蟹的抗病能力,减少死亡率。尤其是噬菌蛭弧菌微生物生态制剂中的蛭弧菌、噬菌体对虾蟹养殖中常见的弧菌和气单胞菌等革兰氏阴性细菌有独特的“寄生”和“裂解”的功能。这种防治措施,在虾蟹养殖生产实践中已被证明是行之有效的,即使危害较大的无特效药治疗的病毒性疾病,微生物生态制剂也是有辅助作用的,在有效抑制细菌病的同时,可以延缓病毒性疾病的暴发。因此,微生物生态制剂在虾蟹养殖中的应用值得推广。本文着重介绍微生物生态制剂之一——蛭弧菌微生物生态制剂在虾蟹养殖中的应用。蛭弧菌是正常微生物菌群成员之一,它经过严格的分类和鉴定,在自然生态环境中无毒、无害。蛭弧菌来源于自然生态环境还可再回归于自然生态环境。蛭弧菌可以有选择性的寄生和裂解有害细菌,它有专性、兼性厌氧菌株之分,兼性厌氧菌株在有氧或缺氧的条件下都能生长,且能发挥作用。受光照、天气变化影响较小,适应性较强,特别适合高温季节使用,不会造成水体缺氧。蛭弧菌为广盐性,海水、淡水水域均有蛭弧菌存在。1蛭弧菌微生物生态制剂在虾蟹养殖中的应用2001年中国水产科学院黄海所徐琴等[1]将将球形红假单胞菌、蛭弧菌及粘红酵母分别混合配制,得到4种微生物生态制剂混合物,将这些微生物生态制剂混合物分别加入中国对虾幼体培育水体中,研究其对中国对虾幼体生长和非特异性免疫的影响。结果表明,使用这4种微生态制剂混合物均可极显著地提高幼体变态率,存活率提高16.86%-34.22%,体长增加0.64-1.29mm;M1-P5期的体长平均增长率也高出17%-40%;酚氧化酶和超氧化物歧化酶活力也显著(P<0.05)高于对照组。其中添加浓度为2×105pfu/ml蛭弧菌和球形红假单胞菌试验组的效果最好。不同配伍的微生物生态制剂对中国对虾的作用效果不尽相同。添加蛭弧菌和球形红假单胞菌联合使用在各方面都表现出协同作用,显示出其联合使用的优势。日照黄海水产育苗场在0.1M3的水槽中,每槽放南美白对虾4000尾,投喂蛭弧菌微生物生态制剂。结果实验组虾苗变态率91.4-94.15%,成活率53.9–63.7%。而对照组变态率77%,成活率44.4%。出苗量比对照组提高10-15%。在南美白对虾苗放养1个月后,投入蛭弧菌微生物生态制剂,每天1次,连用3天,30天为一个周期。结果实验池对虾病毒病发病时间较对照池延迟10天,产量增加40%。中国海洋大学唐洛明在白、兰对虾养殖过程中,用蛭弧菌微生物生态制剂防治细菌病。从虾苗运输时就开始使用蛭弧菌培养液,用量比蛭弧菌培养液与水体比为1:1000暂养30天后移苗时,其成活率达到99%以上。在该校水产养殖试验基地,使用蛭弧菌培养液,三天后水质明显变清,透明度增加。在试用期间,白、兰对虾生长速度平均每日增加2mm左右,色泽好,活力强,无任何疾病征兆。从以上实验证明,蛭弧菌培养物可以提高育苗的成活率;有显著的防病效果;提高产量,增产率可达395.60-482.14%;改善养殖水体,无污染。福建漳州陈跃生﹡用蛋白营养剂500ml/亩/米,加蛭弧菌微生物生态制剂50ml/亩/米(浓度为2×105pfu/ml)泼洒虾蟹养殖水体。实验到13天时,发现虾蟹苗个体整齐、活力好、成活率高,生长速度比对照组大1/2-1/3。在虾蟹苗投喂饲料时,继续使用蛋白营养剂500ML加蛭弧菌微生物生态制剂拌料。到实验40天时,使用蛋白营养剂和蛭弧菌微生物生态制剂的试验组的虾蟹苗生长到6-8cm,对照组仅4-6cm。2蛭弧菌微生物生态制剂的使用方法2.1预防为主防治结合科学使用实施预防为主、防治结合,适时使用在虾蟹病害的防治上蛭弧菌微生物生态制剂。使用蛭弧菌微生物生态制剂,不论是浸泡、泼洒或内服,都只是起到一个“接种”的作用,即向养殖水体中或虾蟹体内输入一定数量的菌种,让其利用合适的环境,合适的营养快速繁殖逐步成为养殖环境或虾蟹体内的优势种群,通常这段时间需要3-5天。而蛭弧菌大量吞噬有害细菌,抑制或消灭有害细菌,又需要一个时间过程,尤其是当有害细菌的数量过多时,这个过程则更长。为此,我们在使用蛭弧菌蛭弧菌微生物生态制剂防治虾蟹病害时,一定要坚持预防为主、防治结合的原则,根据虾蟹发病规律和病情预测资料进行科学分析,把握时机,提前5-10天使用,使之在病害大举侵袭前就形成优势菌群,将病害控制在萌芽状态。2.2种群促进优势互补配伍使用﹡陈跃生《浅谈无公害对虾养殖新模式》光合细菌、芽孢杆菌在代谢过程中,具有独特的产氢、固氮、分解机物的生理特性。蛭弧菌在环境中具有独特的寄生和溶解有害细菌的生物学特性。研究证明,防治虾蟹病害时,蛭弧菌微生物生态制剂和其他微生物生态制剂配伍使用,可以有效地调节水体pH值,降解亚硝酸盐,维持生态平衡,改善养殖水体;促进新陈代谢,提高虾蟹的抗病能力,减少死亡率。2.2.1蛭弧菌蛭弧菌微生物生态制剂和芽孢杆菌微生物生态制剂芽孢杆菌的作用原理,一方面在于代谢过程中耗氧,并产生相应的酶,合成色氨酸,蛋白质的分解加强;另一方面芽孢杆菌可以迅速形成菌膜,并具有生物拮抗作用。目前常用的菌株有枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌。研究表明,芽孢杆菌能产生多种消化酶,帮助动物对营养物质的消化吸收。芽孢杆菌具有较强的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性,同时还具有降解饲料中复杂碳水化合物的酶,如果胶、葡聚糖、纤维素等酶,其中很多是动物本身不具有的酶。研究发现枯草芽孢杆菌具有能分泌大量的细胞外酶如蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶及卵磷脂酶。芽孢杆菌在动物肠道内生长繁殖,能产生多种营养物质如维生素、氨基酸、有机酸、促生长因子等,参与动物机体新陈代谢,为机体提供营养物质。2.2.2蛭弧菌蛭弧菌微生物生态制剂和光合细菌微生物生态制剂光合细菌是地球上最早出现具有原始光能合成体系的原核生物,是在厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌的总称。光合细菌广泛存在于地球生物圈的各处。在水产养殖中,能够降解水体中的亚硝酸盐、硫化物等有毒物质,实现充当饵料、净化水质、预防疾病、作为饲料添加剂等功能,它的诸多特性,使其在无公害水产养殖中具有巨大的应用价值。光合细菌广泛分布于自然界的土壤、水田、沼泽、湖泊、江海等处,主要分布于水生环境中光线能透射到的缺氧区。光合细菌的适宜水温为15—40℃,最适水温为28—36℃。它的细胞干物质中蛋白质含量高达到60%以上,其蛋白质氨基酸组成比较齐全,细胞中还含有多种维生素,尤其是B族维生素极为丰富,Vb2、叶酸、泛酸、生物素的含量也较高,同时还含有大量的类胡萝卜素、辅酶Q等生理活性物质。因此,光合细菌具有很高的营养价值,这正是它在水产养殖中作为培水饵料及作为饲料添加成分物质基础。光合细菌在有光照缺氧的环境中能进行光合作用,利用光能进行光合作用。在光能进行光合作用过程中,利用光能同化二氧化碳结合,但不能产生氧气的。光合细菌细胞内只有一个光系统,光合作用的原始供氢体不是水,而是H2S,这样它进行光合作用的结果是产生了H2,分解有机物,同时还能固氮生氨。光合细菌在自身的同化代谢过程中,又完成了产氢、固氮、分解有机物三个自然界物质循环中极为重要的化学过程。这些独特的生理特性使它们在生态系统中的地位显得极为重要。在自然界淡、海水中通常每毫升含有近百个光合细菌,它们在水中光照条件下可直接利用有机酸、氨基酸、氨和醣类等有机物,并使自身得以增殖,同进净化了水体。2.3依据规律对症下药适时使用虾蟹发病通常有四个因素:一是环境条件的突然改变,如温度的变化、溶氧不足及水体过肥等,都会导致虾蟹发病;二是病原体因素,消毒不彻底使养殖环境带有致病菌,或周围养虾蟹的塘口发病,通过流水传染;三是种质因素,虾蟹苗种不纯,本身携带病菌,或体质瘦弱适应环境或抗病能力差;四是人为因素,饲养管理不得法,投喂饵料不足,营养太差,病害侵袭和人为的惊吓也会使虾蟹致病。通常虾蟹一年有两个发病高峰期,一是5、6月份幼体发病高峰期;二是7、8、9月份高温发病期。因而,在使用蛭弧菌微生物生态制剂防治虾蟹病害上,一定要根据发病的原因、流行的规律及发病高峰期,抓住关键对症下药,充分发挥蛭弧。

(1)按使用目的,有生长促进剂、免疫促进剂、治疗剂、水质改良剂等;

(2)按菌种不同,有芽孢杆菌制剂、乳酸菌制剂、酵母菌制剂、蛭弧菌、光合细菌等;

(3)按菌种多少,有单一菌种制剂、复合菌种制剂。

微生态制剂大都具有以下三个基本特征:

1体外实验中能拮抗病原菌或快速降解有机质;

2能在养殖动物肠道、养殖水体中存活;

3感染实验中能提高养殖动物对病原体的抵抗力,促进动物生长。

按照菌种的不同分类可以分为:

(1)乳酸菌类,厌氧或兼性厌氧生长,能分解糖类产生乳酸;在动物体内通过生物拮抗降低PH,阻止和抑制病原菌的侵入和定植,维持肠道微生态平衡。

(2)芽孢杆菌,主要有枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌等,芽孢杆菌具有耐酸、耐盐、耐高温(100℃)的优点,能使空肠内的PH下降,促进淀粉、纤维素等分解。

(3)酵母菌,是喜生长于偏酸环境的需氧菌,可在肠道内大量繁殖。酵母菌富含动物所必需的多种营养成分,是维生素和蛋白质的来源,可以增加消化酶的活性,并能增加非特异性免疫系统的活性。

(4)光合细菌,是具有光合作用能力的异养微生物。它主要利用小分子有机物来合成自身生长繁殖所需养分,厌氧条件下可以把硫化氢转化为无害物质。它不仅是安全的能量来源,而且可以产生抗活性病毒因子等生物活性物质。

(5)蛭弧菌,革兰氏染色阴性,短杆状,具有极长的单鞭毛,其个体很小。其主要生物学特点是寄生在某些细菌上并能导致其裂解,对大多数革兰氏阴性细菌如志贺氏菌属、沙门氏菌属、埃希氏菌属、弧菌属、假单胞菌属、钩端螺旋体等微生物均有较强的裂解活性;初步认为蛭弧菌对细菌形成噬斑的适宜PH值为7~8,在液体中生长繁殖的温度范围是20~30℃,在50℃时30分钟即失活。

2、微生态制剂的作用机理

(1)微生态平衡机理:

健康动物体内的微生态平衡会由于病原侵入、环境因素发生变化等原因而被破坏,如果破坏程度超过了宿主动物的适应能力,会使动物的免疫力下降,导致营养和生长障碍以及疾病的发生。这时补给适当的微生物,微生态环境得到及时修补,让动物回复健康状态。生物夺氧也属于这一机理的一部分,一些需氧菌微生态制剂特别是芽孢杆菌可以消耗肠道内的氧气,造成厌氧环境,有助于厌氧微生物的生长,从而使失调的菌群平衡恢复到正常状态。

(2)疾病防治作用机理:

有的益生菌通过竞争作用调节宿主体内菌群结构,包括竞争粘附位点、对化学物质或可利用能源的争夺以及对铁的争夺。有的益生菌在生长过程中产生抑菌物质,例如乳酸菌产生乳酸、乳酸菌素、过氧化氢等,对病原微生物具有抑制作用。有的益生菌具有免疫刺激作用,是良好的免疫激活剂,如酵母细胞壁。蛭弧菌则是首先与宿主细胞激烈碰撞,没有鞭毛的一端吸附到宿主细胞表面,菌体高速转动并释放各种酶,使宿主细胞壁形成小孔,蛭弧菌由此进入宿主体内,迅速复制DNA,然后菌体延伸进行均等二分裂形成子代并从宿主细胞体内释放出来,最终导致宿主细胞解体,起到杀菌防病的作用。

(3)促生长作用机理:

作为饵料添加剂的许多益生菌,其菌体本身含有大量的营养物质,同时随着它们在动物消化道内的繁衍、代谢,可产生动物生长所需的营养物质,还可产生消化酶类,协助动物消化饵料,提高饵料转化率。

(4)水质净化机理:

益生菌进入养殖池后,可以参入水体最基础的物质循环,把有机物降解为硝酸盐、磷酸盐和二氧化碳等,为单细胞藻类生长繁殖提供营养;而单胞藻的光合作用又为有机物的氧化分解、微生物及养殖动物的呼吸提供溶解氧,构成一个良性生态循环。有的益生菌如光合细菌具有独特光合作用能力,能直接消耗利用水中有机物、氨态氮、硫化氢等;而反硝化细菌则可通过反硝化作用除去水中的亚硝态氮,从而改善水质。

3、微生态制剂在水产养殖中的应用效果

Kazasa
(1986)首次将益生菌应用于水产养殖,用一株从土壤中分离的芽孢杆菌处理日本鳗鲡,降低了由爱德华氏菌引起的死亡。Austin和Akifumi等报道,在虾、贝生产中,利用溶藻弧菌、产色素细菌控制苗期的多种病原性弧菌。Moriarty报道,在印度尼西亚所做的实验表明,向养殖水体中加入某些特定的芽孢杆菌,可以使水体中的发光弧菌等有害弧菌数量大大降低,实验池对虾的成活率大大高于对照池。有实验证明,酵母菌与乳酸菌共用,可提高印度对虾幼苗的生长率、存活率。张新明等报道一株藤黄微球菌对病原性鳗弧菌、副溶血弧菌、沙蚕弧菌、漂浮弧菌具有良好的拮抗作用。陈家长等利用蛭弧菌制剂对河蟹养殖池进行为期3个月的泼洒,蟹池细菌总数呈几何级数下降,氨氮、COD、硫化物都有不同程度下降,使用蛭弧菌的蟹池全年没有发生病害,河蟹生长速度加快,成活率提高。何义进等在异育银鲫养殖实验中,加入预先培养的鲫鱼出血性腹水病病原菌点状产气单胞菌,然后加入蛭弧菌,定期检测水中病原菌的数量,结果显示,随着时间的延长,水体中病原菌数量明显减少,一周后检测不到。张淑华等将益生菌加入对虾配合饵料中饲喂对虾,结果表明饲料中添加0.1%益生菌能使对虾成活率提高5.03%~6.18%,单产提高8.76%~12.45%。王祥红在系统研究养殖和海捕的中国对虾健康成虾肠道微生物区系的基础上,筛选出多个有益菌株,其中两株有益菌施入对虾育苗水体后能够增加不同发育时期对虾幼体的变态率和成活率,同时虾苗的抗病力、低盐度耐受力等都有所提高,平均体重和体长都有所增加。李卓佳等报道在对虾养殖中使用微生态制剂具有净化水质、提高对虾免疫功能和养殖成活率的作用。

乳酸菌被认为是有益生作用的主要菌种,此外,还有酵母菌、枯草杆菌、双歧杆菌、芽孢杆菌、链球菌等40多种,鱼类生产上使用的益生素多为复合菌种。吴垠报道益生素微生态制剂可以提高杂交鲤的越冬能力,死亡率从65%下降到52%。

周东明等测定了温度、PH、抗生素对活菌剂活性的影响,芽孢杆菌耐热性强,100℃
处理2min基本没损失,而酵母菌、乳酸菌在温度超过80℃
时活性损失很大。鱼颗粒饲料生产过程中温度一般在80~100℃,对芽孢杆菌没有影响,但对乳酸菌、酵母菌影响较大。pH在2.2~7.0范围内,各种菌基本上不受损害。鱼胃内PH一般在2~3,肠道pH在5~7,这样的pH范围适于上述菌种生长。使用益生菌制剂要注意与抗病促生长物质的搭配问题。呋喃唑酮、氯霉素对上述各种菌有很强的抑制作用,金霉素、红霉素、土霉素抑制作用次之;马杜拉霉素、杆菌肽锌、喹乙醇对芽孢杆菌基本没有抑制作用。对乳酸菌、酵母菌则有微弱的抑制作用。

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